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河北雄峙管道制造有限公司

重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

發(fā)布時間:    來源:河北雄峙管道制造有限公司   閱覽次數(shù):9115次

對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴(yán)格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài),細胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對極個別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決。PEI轉(zhuǎn)染試劑對復(fù)合物孵化的時間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

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注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細胞,請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!廣東PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣用PEI轉(zhuǎn)染試劑時,一般和DNA的比例是多少呢?

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方法:1.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。2.制備PEI-DNA混合物:以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應(yīng)總體積為例。準(zhǔn)備兩支1.5mL離心管,一管將質(zhì)粒DNA(總量2-8μg為佳)加入240μLHBS中,混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM,充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養(yǎng)基中,輕輕搖動平皿混勻,置于含5%~7%CO2的37℃溫箱孵育。注:每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻,保證所取的濃度一致。3.培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預(yù)熱的含有血清的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng),16h左右可以觀測到報告基因的表達。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!

接種細胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物!有誰用過40K的PEI轉(zhuǎn)染試劑?

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材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑。無動物源成分PEI轉(zhuǎn)染試劑中國代理權(quán)

哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比高呢?重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。上海曼博生物是Polysciences官方授權(quán)du jia代理商,更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問題,歡迎咨詢上海曼博生物!重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗區(qū)達爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團隊。PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote是上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司的主營品牌,是專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計算機軟件的開發(fā)、設(shè)計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進出口、傭金代理(拍賣除外)。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動】公司,擁有自己獨立的技術(shù)體系。公司以用心服務(wù)為重點價值,希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力,將生物醫(yī)藥科技(人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計算機軟件的開發(fā)、設(shè)計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進出口、傭金代理(拍賣除外)?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動】等業(yè)務(wù)進行到底。自公司成立以來,一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽求發(fā)展”的經(jīng)營理念,始終堅持以客戶的需求和滿意為重點,為客戶提供良好的血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍牙無線標(biāo)簽機,從而使公司不斷發(fā)展壯大。

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裝滿 等 22 人贊同該回答

裝滿了水的氣球有多大的威力呢?要想了解就必須親自體會一下,你要利用你的投射技巧,使用水球攻擊對手,打敗他們。面對炎炎夏日,水球大戰(zhàn)無疑是一場為消暑而存在的活動。在水球大戰(zhàn)他們分別用裝滿水的氣球炮彈來攻 。

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第1樓
空氣 等 17 人贊同該回答

空氣能熱泵烘干機是利用逆卡諾原理,依靠輸入少量的電能吸收空氣中無償?shù)臒崃坎⑵滢D(zhuǎn)移到烘干庫房內(nèi)輸入1度電能量能產(chǎn)生4度電熱能),實現(xiàn)烘干房的溫度提高,配合相應(yīng)的除濕排濕設(shè)備實現(xiàn)物料的干燥??諝饽軣岜煤?。

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第2樓
制粉 等 92 人贊同該回答

制粉原材料經(jīng)過預(yù)處理后,需要進行制粉。制粉是將原材料研磨成細粉末的過程,目的是增加原材料的表面積,提高其反應(yīng)性和可塑性。制粉的方法有干法和濕法兩種。干法制粉是將原材料在干燥的環(huán)境下進行研磨,適用于硬度 。

滾筒裝配流水線安裝廠家
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第3樓
電動 等 97 人贊同該回答

電動滾筒行業(yè)標(biāo)準(zhǔn):1、JB3669-1984油冷式隔爆電動滾筒2、JB3684-198冷式電動滾筒3、JB/T7330-2008電動滾筒4、ZBJ81002-1987油冷式隔爆電動滾筒技術(shù)條件5、JB 。

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第4樓
納豆 等 51 人贊同該回答

納豆凍干機是由制冷機組、真空機組、循環(huán)系統(tǒng)、電控系統(tǒng)和凍干箱體等組成,利用升華原理,進行低溫冷凍、真空、循環(huán)控溫、冷凝脫水等運行工作的干燥設(shè)備。納豆凍干粉生產(chǎn)加工是經(jīng)過挑選好的的新鮮納豆原料,進行浸泡 。

上海陶瓷貼片保險絲尺寸
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第5樓
選用 等 78 人贊同該回答

選用貼片保險絲注意事項:1、在所使用的電路中流經(jīng)保險絲的常態(tài)電流大小。通常情況下我們要預(yù)先設(shè)定一個減額量,然后按下面的原則來進行選擇:即常態(tài)電流必須小于額定電流與減額系數(shù)的乘積。2、按照UL規(guī)格的規(guī)定 。

武漢超高速清洗機維護
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第6樓
超聲 等 17 人贊同該回答

超聲波清洗機的應(yīng)用領(lǐng)域:一、超聲波清洗機清潔牙科和醫(yī)療器械牙科和醫(yī)療器械快速消毒前清潔。超聲波清洗機可降低交叉污染和的風(fēng)險。二、超聲波清洗機實驗室儀器清潔快速,安靜,徹底的實驗室儀器清潔。非常適合所有 。

江蘇染色效果好全自動滴染封片一體機自主研發(fā)
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第7樓
JQ 等 32 人贊同該回答

JQ-DS200全自動單獨滴染HE染色機由脫水模塊、玻片處理模塊、染色模塊及封片模塊組成。脫水模塊:由控制系統(tǒng)、樣本傳輸系統(tǒng)、脫水缸、石蠟缸組成。玻片處理模塊:由玻片處理平臺包括試劑槽、機械臂和加熱模 。

貴州干冰清洗機哪家好
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第8樓
蘇普 等 48 人贊同該回答

蘇普曼小型干冰清洗機清洗模具毛刺油污耐磨損效率高Tech-5 別名:塊狀干冰清洗機 Tech-5特點: Tech-5是塊狀顆粒液態(tài)三合一干冰清洗機,特殊的T5TechClean清潔系統(tǒng)利用刨冰及液態(tài)二 。

北京電子線圈創(chuàng)新服務(wù)
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第9樓
電動 等 53 人贊同該回答

電動車無刷電機控制器短路的工作模型解決方案:溫升公式:Tj=Tc+P×Rth(jc)根據(jù)單脈沖的熱阻系數(shù)確定允許的短路時間工作溫度越高短路保護時間就應(yīng)該越短1短路模型及分析短路模型如圖1所示,其中畫出 。

哈爾濱韓餐加盟哪家好
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第10樓
樸成 等 68 人贊同該回答

樸成東拌飯屋是一家專注于新鮮、美味、健康的拌飯品牌 ,秉承“用心做好每一碗拌飯”的經(jīng)營理念,致力于讓每一位食客都能享受到自己鐘愛的那一款,樸實的口味讓食客體驗到傳統(tǒng)韓式特色。樸成東拌飯屋始終堅持為消費 。

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